條件性過(guò)表達小(大)鼠

技術(shù)原理簡(jiǎn)介

條件性過(guò)表達小(大)鼠的構建主要是通過(guò)Cre/LoxP重組系統來(lái)實(shí)現的。該系統是位點(diǎn)特異性重組酶系統，已發(fā)展成為在體內、外進(jìn)行遺傳操作的有力工具。其可以使靶基因的表達或缺失發(fā)生在試驗動(dòng)物發(fā)育的某一階段或某一特定的組織器官。此外，若與控制Cre表達的其他誘導系統相結合，還可以對某一基因同時(shí)實(shí)現時(shí)空兩方面的調控。通過(guò)構建帶有廣泛表達啟動(dòng)子-LoxP-Stop-LoxP-目的基因的條件性調控表達框架，通過(guò)顯微注射制備在特定位點(diǎn)，如Rosa26, H11等位點(diǎn)，帶有條件性調控表達框架的敲入小(大)鼠模型，轉基因在正常情況下并不表達，只有與相應的組織特異性表達的Cre/CreERT2小鼠雜交后，因Stop終止序列在特定的組織中被去除，從而達到轉基因在誘導性/特定組織中特異性表達的目的。

Rosa26或H11位點(diǎn)的優(yōu)勢

表達Pattern穩定: 定點(diǎn)敲入構建過(guò)表達，不像隨機插入基因組的轉基因，表達特異性和表達量（expression pattern）穩定
表達Pattern不受上下游DNA元件影響： Rosa26 or Hipp11(H11)無(wú)影響基因特異表達的調控元件，不會(huì )影響敲入的啟動(dòng)子的表達Pattern

TALEN/CRISPR構建條件性敲除小(大)鼠技術(shù)流程圖

服務(wù)流程及周期

服務(wù)流程及周期圖